Bryan Hodukavich — Austin Abrams
É o protagonista do filme. Ele trabalha com transporte de material biológico e recebe a tarefa de levar uma encomenda ao Hospital Geral de Raccoon City. O problema é que a cidade está no meio de um surto de armas biológicas, e o que deveria ser uma entrega comum acaba virando uma luta para sobreviver.
Michelle — Sara Paxton (voz)
É a namorada de Bryan, mas não aparece em cena. A gente só ouve sua voz. Logo no começo, ela conta que está grávida. A partir daí, Bryan quer chegar em casa o quanto antes.
Oficial Wilson — Johnno Wilson
É o xerife do condado de Arklay. Ele encontra Bryan durante a viagem e, quando percebe a situação em que o rapaz se meteu, decide ajudá-lo a chegar a Raccoon City.
Maxine — Kali Reis
É uma agente armada da Umbrella que atua como motorista e escolta durante a missão. Treinada para o combate, Maxine acaba tendo de enfrentar as criaturas que tomaram conta da cidade.
Paul — Paul Walter Hauser
Funcionário da Umbrella que acompanha Bryan e Maxine durante a missão. Ele está envolvido na entrega e ajuda a esclarecer como começou o surto.
Carl — Zach Cherry
É um cientista da Umbrella que trabalha no hospital. Ele procura uma cura para a infecção.
